Ткани перинатального происхождения - уникальный источник клеток для регенеративной медицины. Часть I. Пуповинная кровь

• Романов Юрий Аскольдович
• Романов Андрей Юрьевич

Резюме

На протяжении последних 20 лет ткани перинатального происхождения стали объектом нарастающего внимания со стороны исследователей и практикующих специалистов в связи с перспективами использования в клеточной терапии широкого спектра приобретенных или наследственных заболеваний. Сотни клинических исследований направлены на изучение безопасности и эффективности клеток, выделяемых из пуповинной крови, плаценты, стромы пупочного канатика, плодных оболочек и амниотической жидкости, при самых разнообразных патологических состояниях в кардиологии, неврологии, ангиологии, травматологии и ортопедии, при заболеваниях печени, почек, репродуктивной системы и т.д. В данном обзоре авторы попытались суммировать некоторые данные, касающиеся свойств и перспектив применения в регенеративной медицине клеток и бесклеточных продуктов, получаемых всего из 2 источников: пуповинной крови и стромы пупочного канатика.

Ключевые слова:перинатальные ткани, пуповинная кровь, пупочный канатик, стволовые клетки, клеточная терапия, регенеративная медицина

Есть мнение, что первые плацентарные появились на на­шей планете около 60-100 млн лет назад. Стало быть, тогда же свет увидели и первые связанные с родами "биологические отходы". В те стародавние времена они, скорее всего, становились одним из звеньев чьей-либо пи­щевой цепочки: по крайней мере, именно эта "традиция" доминирует и в современном животном мире. Конечно, человек разумный давно от этого отказался, хотя упомина­ния о необходимости сжечь, закопать или еще каким-либо образом скрыть послед можно найти в летописях совсем еще недавних времен и даже в некоторых современных обычаях.

Между тем основные компоненты этих самых побочных продуктов репродуктивной программы человека остались неизменными. Это плацента, плодные оболочки, пуповина, пуповинная кровь (ПК) и амниотическая жидкость. В раз­ные годы и с разным успехом каждый из этих компонентов пытались использовать во благо. Из плаценты готовили (и продолжают готовить) биологически активные добавки в питательные кремы, экстракты и препараты со стимулиру­ющим эффектом, а плодные оболочки нашли ограниченное применение при лечении ожогов и для закрытия тканевых дефектов.

Отношение к ПК также долгое время оставалось усто­явшимся: кровь, она и есть кровь, и самое лучшее, для чего ее можно использовать, так это перелить пациенту, нуж­дающемуся в трансфузии донорской крови при отсутствии последней.

В отечественной литературе сведения о применении ПК в терапевтических целях можно встретить в докумен­тах, датированных еще 1930-1940-ми гг. Именно тогда переливание плацентарной крови стали рассматривать как альтернативу трансфузии донорской или трупной крови, о чем свидетельствует целый рад публикаций и норматив­ных документов. В годы Великой Отечественной войны ПК спасла не одну тысячу жизней: еще в 1939 г. Наркомздрав СССР издал инструкцию "По организации в родовспомога­тельных учреждениях сбора, хранения и использования пла­центарной крови для целей переливания", а в 1941 г. обязал все родовспомогательные учреждения страны собирать ее и отправлять в госпитали для восполнения острой кровопотери (приказ № 59 от 12.11.1941 "Об организации сбора плацентарной крови во всех родильных домах и родильных отделениях больниц для целей переливания, хранение и использование ее"). В послевоенные годы практика пере­ливания цельной ПК сохранилась лишь в единичных странах и лишь по некоторым показаниям [1].

Клеточный состав пуповинной крови

До последнего времени интерес кПКв плане клини­ческого применения определялся прежде всего высоким содержанием кроветворных (гемопоэтических) стволовых клеток (ГСК), сходным с их содержанием в костном мозге: 1-10 ГСК на 1000 ядросодержащих клеток. Однако по срав­нению с клетками костного мозга клетки ПК обладают более высоким пролиферативным потенциалом [2], повышенным содержанием популяции, инициирующей длительную куль­туру (LTC-IC), и имеют более высокую теломеразную актив­ность [3-5]. Эти особенности клеток ПК связаны с их менее зрелым статусом по сравнению с клетками костного мозга или других "взрослых" источников. Подтверждением высо­кой активности ГСК ПК является и то, что, несмотря на неко­торое отставание в темпах восстановления нормальной фор­мулы крови после миелоаблативного кондиционирования (высокодозной химиотерапии), доза требуемых для успеш­ной трансплантации клеток ПК примерно в 10 раз ниже рав­ной по эффективности ядросодержащих клеток костного мозга [14, 15].

В дополнение к гемопоэтическим СК ПК содержит и дру­гие популяции клеток, в частности способных инициировать и/или стимулировать ангиогенез. Так, популяция CD34+/ СD19⁺-клеток, составляющая чуть менее половины всех ГСК ПК, способна дифференцироваться в функционально актив­ные эндотелиальные клетки in vitro и in vivo [6], а VEGF-R3+/ CD34⁺-клетки сохраняют это свойство на протяжении 40-кратного размножения в культуре [7]. При этом содер­жание подобных клеток в ПК примерно в 10 раз выше, чем в костном мозге. Нефракционированная ПК также обладает способностью стимулировать ангиогенез, что подтверждено в целом ряде исследований [8, 9].

Относительно недавно в ПК была выявлена попу­ляция CD34-негативных клеток с эмбрионально-подобными характеристиками (экспрессирующих OCT-4, Nanog, SSEA-3 и SSEA-4), способных дифференцироваться в производные всех 3 зародышевых листков: мезо-, экто- и эндодермы [10].

Присутствие в ПК клеток с аналогичными свойствами - нео­граниченных соматических стволовых клеток (Unrestricted Somatic Stem CeLLs, USSC) - описано и в работах других авто­ров [11, 12].

Текущее применение клеток пуповинной крови

Совсем скоро 2018 г. ознаменуется 30-летним юби­леем трансплантации ПК: под руководством профессора E. GLuckman во Франции была выполнена первая родствен­ная трансплантация 5-летнему пациенту с анемией Фан-кони [13]. В последующие годы трансплантация клеток ПК стала общепризнанным способом восстановления кровет­ворения у пациентов детского возраста и взрослых со зло­качественными гематологическими заболеваниями [14]. По последним данным, для этих целей более 700 тыс. гото­вых к трансплантации единиц ПК включено в международ­ные регистры; еще около 1 млн образцов хранятся в семей­ных банках пуповинной крови. В мире выполнено более 40 тыс. трансплантаций клеток ПК; с помощью данного под­хода вылечены более 25 тыс. пациентов [15]. В целом транс­плантация ПК показала себя эффективной альтернативой трансплантации костного мозга, особенно в случае расовых и/или этнических особенностей пациентов, для которых трудно подобрать совместимого неродственного донора, даже при наличии более 20 млн потенциальных доноров костного мозга [14].

Другие компоненты пуповинной крови

К их числу можно отнести эритроциты, тромбоциты и жидкую составляющую крови - плазму (сыворотку). Наи­большее применение в клинической практике (в том числе в неонатологии) нашло, пожалуй, переливание аутологичных или донорских "переносчиков газов" - эритроцитарной массы [16].

Наиболее частыми показаниями к переливанию эритроцитарной массы или цельной ПК являются анемия недоно­шенных [17-20] и острая кровопотеря как результат хирур­гического вмешательства [21, 22]. Однако заместительная гемотрансфузия или переливание донорских эритроцитов, применяемые в качестве стандартного метода коррекции тяжелых форм анемии, сопряжены с риском трансфузионных осложнений, потенцируют угнетение продукции эндо­генного эритропоэтина, что может приводить к рецидивам анемии. Кроме этого, использование для данных целей донорской ПК несет определенные риски, связанные с воз­можностью аллоиммунизации и/или передачи инфекцион­ных, в том числе вирусных, агентов [23]. В этой связи предпо­чтение отдается использованию именно аутологичной крови [24, 25]. Примечательно, что реинфузия клеток аутологичной ПК пациентам первых дней жизни с гипоксической/ишемической энцефалопатией также показала обнадеживающие результаты [26].

В регенеративной медицине использование сыворотки ПК и лизата тромбоцитов находит все более широкое при­менение в связи с поиском оптимального состава сред для культивирования клеток, предназначенных для клиниче­ского применения и не содержащих ксеногенных компонен­тов [27-31].

Совсем недавно открылась еще одна потенциальная область применения трансфузии плазмы ПК: выяснилось, что ее переливание старым животным не только вызы­вает омолаживающий эффект, но и способствует нейрогенезу, улучшению функций гиппокампа, повышению обучаемости и памяти [32]. Отчасти подобный эффект может опосредоваться как целой плеядой растворимых молекул [33], содержащихся в плазме/сыворотке ПК (цитокинов, хемокинов, ростовых и антиапоптотических факто­ров) (табл. 1), так и содержащимися в них микровезикулами и экзосомами [34].

Примечательно, что сходные регуляторные сигналы, циркулирующие в крови плода и попадающие в кровоток будущей матери, способны как оказывать омолаживающий эффект в ходе беременности, так и влиять на продолжитель­ность жизни в дальнейшем [35]. Не исключается перспектив­ность аналогичного подхода и к лечению ряда возрастных нейродегенеративных заболеваний: болезни Паркинсона, деменции и болезни Альцгеймера, бокового амиотрофического склероза [36, 37]. Сами фетальные клетки также спо­собны проникать в материнский кровоток во время беремен­ности [38] и могут быть обнаружены даже через несколько лет после родов [39, 40].

С наличием в сыворотке ПК факторов роста, стимулиру­ющих регенерацию эпителиальных клеток, связана еще одна область ее применения: лечение поражений роговицы раз­личного генеза и синдрома сухого глаза [41-43].

Возможность применения АВ0/ Rh-совместимой пуповинной крови

Как уже отмечалось, ПК может быть безопасно исполь­зована в качестве замены периферической донорской крови для гемотрансфузии. Поскольку HLA-типирование до относительно недавнего времени было недоступно, а каких-либо нежелательных последствий переливания не отме­чено, логично предположить, что переливание ПК может применяться без соответствующего "кондиционирования" реципиента. Подтверждение этому можно найти в работах многих авторов. Так, более чем 100 пациентам детского возраста с тяжелой анемией была проведена трансфузия цельной АВ0-совместимой крови (средняя доза составила 85 мл) без предшествующего HLA-типирования [44]. Неже­лательных последствий, в том числе реакции "трансплантат против хозяина" (РТПХ) не выявлено, в связи с чем ПК была признана доступным материалом для трансфузии в случаях, когда донорская периферическая кровь недоступна по эко­номическим или социальным причинам. Результаты перели­вания 413 единиц ПК 129 пациентам с различными заболе­ваниями (онкологическими, системной красной волчанкой, апластической анемией и т.д.) без HLA-типирования и "кон­диционирования" приведены в работах и других исследо­вателей [45-47]. Интересно, что трансфузия ПК пациентам, инфицированным ВИЧ, сопровождалась временным повы­шением содержания в крови CD34-положительных клеток без признаков РТПХ [48].

Таким образом, суммируя имеющиеся данные литера­туры, можно заключить, что переливание ПК пациентам с нормально функционирующей иммунной системой явля­ется безопасной процедурой, не приводящей к тяжелым осложнениям. В данной ситуации, по мнению N.H. Riordan и соавт., "самое плохое, что пуповинная кровь может сде­лать, это не сделать ничего" [49].

Клеточная терапия и регенеративная медицина

Эти два словосочетания появились на страницах науч­ных и медицинских изданий относительно недавно, каких-то 15-20 лет назад. Сегодня существует несколько опреде­лений этих терминов, наиболее емким из которых можно считать следующее: "Клеточная терапия - комплекс меди­цинских приемов, основанных на введении в организм паци­ента (реципиента) живых клеток с целью восстановления утраченной функции, лечения, профилактики или снижения тяжести заболевания". По своей сути понятие "клеточная терапия" весьма близко к другому часто используемому определению - "регенеративная медицина", хотя послед­нее, по-видимому, несколько шире: для стимуляции реге­нерации могут быть использованы не только сами клетки, но и различные составы на их основе (включая 3D-матриксы), а также бесклеточные композиции, содержащие секретируемые клетками продукты жизнедеятельности (см. ниже).

Интерес и к самим клеткам ПК, и к возможности их клини­ческого применения огромен, об этом свидетельствует нарас­тающее в логарифмической шкале число научных публикаций и проводимых клинических исследований (табл. 2).

Доклинические исследования

Еще в 2001 г. было показано, что введение клеток ПК эффективно в модели острого ишемического инсульта и способно снижать физический и неврологический дефи­цит у животных, перенесших окклюзию средней мозговой артерии [50]. В последующих исследованиях было установ­лено, что терапевтический эффект может быть достигнут, даже если клетки не достигают пораженной ткани мозга [51, 52], однако зависит от дозы введенных клеток и про­является в уменьшении размера пораженного участка [53]. Одновременно в ткани мозга экспериментальных животных выявлялось повышенное содержание фактора роста нервов (Nerve Growth Factor, NGF), глиального нейротрофического (Glial cell-Derived Neurotrophic Factor, GDNF) и мозгового нейротрофического (Brain-Derived Neurotrophic Factor, BDNF) факторов, что указывает на возможный паракринный эффект введенных клеток. Другим механизмом нейропротекторного эффекта ПК могут быть снижение каспазозависимой гибели клеток стриатума и противовоспалительный эффект в отношении клеток коры мозга [54].

Первое сообщение о возможности применения клеток ПК при экспериментальной гипоксической энцефалопатии относится к 2006 г. [55]. В данном исследовании крысам внутрибрюшинно вводили 10 млн клеток через 24 ч после индуцированной ишемии мозга. В результате через 2 нед было отмечено значительное улучшение моторных функций по сравнению с контрольными животными. Значительное количество клеток ПК выявлялось в поврежденной гемисфере, однако они не экспрессировали маркеры нейрональной или астроцитарной дифференцировки. Положительная динамика в неврологическом статусе животных с перина­тальными поражениями головного мозга в ответ на введе­ние клеток ПК отмечена в работах и других авторов [56-61]. По мнению авторов, введение клеток ПК опосредованно сни­жает уровень апоптоза и вторичной гибели клеток "незре­лого" мозга, а также повышает уровень его пластичности в ответ на ишемию.

Поскольку трансфузия клеток ПК так проявила себя при ишемических поражениях головного мозга, было бы неудивительно, что она проявит себя и при травматических поражениях. Подтверждением можно считать работы, пока­завшие эффективность внутривенной инфузии клеток ПК в модели травмы головного и спинного мозга у крыс [62, 63].

Терапевтический эффект клеток ПК отмечен и при нейродегенеративных заболеваниях. Так, было показано, что введение клеток способно замедлить прогрессию бокового амиотрофического склероза и продлить жизнь трансгенных животных [64, 65]. Системное введение клеток ПК позволяло также уменьшить циркуляторный шок и последующее повреж­дение мозга в модели его теплового повреждения [66].

Таким образом, приведенные выше исследования под­тверждают терапевтический эффект клеток ПК при инду­цированных ишемических и перинатальных повреждениях мозга. Присутствие самих клеток ПК в мозге, по-видимому, не является необходимым, а обнаруженный эффект не свя­зан с замещением поврежденных клеток новообразован­ными из клеток ПК.

Механизм действия клеток пуповинной крови

Несмотря на обширный экспериментальный и клини­ческий материал, подтверждающий эффективность кле­ток ПК при поражениях головного и спинного мозга раз­личного генеза, вопрос о механизмах терапевтической эффективности остается открытым [67, 68]. Считается, что трансплантированные клетки ПК могут участвовать в реге­нерации поражений центральной нервной системы (ЦНС) в качестве уникального регулятора активности нейронов и глиальных клеток благодаря продукции нейротрофических факторов [61]. И сами клетки ПК, и клетки, получаемые путем их дифференцировки in vitro, продуцируют целый ряд нейротрофических факторов, таких как BDNF, GDNF, нейротрофины 3 и 4-5 [69]. Одним из подтверждений этой гипо­тезы можно считать работу C.V. BorLongan и соавт. [51], пока­завших, что внутривенное введение клеток ПК значительно повышает концентрацию GDNF, BDNF и фактора роста нервов (Nerve Growth Factor, NGF) в крови животных с эксперимен­тальным инсультом по сравнению с контрольными, не полу­чавшими инфузии клеток. В качестве другого подтверждения можно рассматривать результаты, полученные при введении клеток ПК непосредственно в мозг после его ишемического повреждения и показавшие стимуляцию "прорастания" нервных волокон из неповрежденного полушария в область поражения [70]. Помимо перечисленных ростовых и нейротрофических факторов, клетки ПК способны синтезировать и секретировать целую плеяду биологически активных сое­динений (GRO-α, MIP-1a, MCP-1, MCP-3, RANTES, SDF-1, G-CSF, GM-CSF, интерлейкины 6 и 8), оказывющих нейропротекторное, иммуномодулирующее, антиапоптотическое и противо­воспалительное действие (см. табл. 1).

Клинические исследования

По данным международного интернет-ресурса www. clinicaltrials.gov, исследования безопасности и эффек­тивности клеток ПК при неонкологических заболеваниях проводятся в целом ряде клинических центров (табл. 3). Большинство из них представляют собой I-II фазы кли­нических исследований, находятся в стадии проведения или "рекрутирования" пациентов, в связи с чем официаль­ные данные об их результативности пока отсутствуют. Тем не менее отдельные сведения можно найти в материалах симпозиумов и конференций на темы "Пуповинная кровь" и "Клеточная терапия", а также в единичных печатных рабо­тах и пресс-релизах, опубликованных в течение нескольких последних лет.

Так, в работе W.-Z. Yang и соавт. представлен анализ лечения 114 пациентов с различными формами невроло­гических заболеваний (параплегия, атаксия, рассеянный склероз, боковой амиотрофический склероз, детский цере­бральный паралич, последствия травматических поражений головного мозга и т.п.) с помощью повторного (до 4-5 раз) интратекального и/или внутривенного введения мононуклеарной фракции клеток аллогенной HLA-несовместимой ПК [71]. Значимых сдвигов в результатах гематологиче­ского, биохимического и иммунного статуса пациентов обнаружено не было. Побочные явления в виде головной боли, кратковременного повышения температуры, тошноты или рвоты были выявлены у 38 (33,3%) пациентов. По всей видимости, столь высокая частота нежелательных реакций связана с тем, что клетки ПК использовали без отмывки от криопротектора и (или) интратекальным способом вве­дения. К сожалению, авторы работы сконцентрировали внимание исключительно на побочных эффектах: данные об эффективности проведенной терапии в публикации отсутствуют.

В более позднем исследовании тех же авторов приво­дятся результаты, полученные при использовании аллогенных клеток ПК у 30 пациентов с врожденной атаксией [72]. После проведенного лечения (от 4 до 6 инфузий) значимое улучшение (>50% по шкале Berg BaLance ScaLe, BBS) было констатировано у 13 пациентов; у 17 пациентов эффект был менее выражен и составлял 5-49%. В целом по группе BBS показатели изменились с 35,62±11,25 до 45,25±9,33 (р<0,001). В отличие от предыдущей работы побочных эффектов терапии не выявлено.

В работе корейских исследователей оценена безопас­ность и эффективность внутривенного введения аутологичных клеток ПК 20 пациентам детского (2-10 лет) воз­раста с установленным диагнозом "детский церебральный паралич" (ДЦП) (11 с тетрапарезом, 6 с гемипарезом и 3 с диплегией) [73]. Клетки были предоставлены частным бан­ком пуповинной крови в Сеуле. Суспензия размороженных "у постели больного" клеток вводилась внутривенно без премедикации и без отмывки от криопротектора в средней дозе 5,5±3,8 (0,6-15,65х10⁷) клеток/кг с последующей регидратационной терапией. Через 6 мес наблюдения улучшение неврологического статуса было отмечено у 25% детей (преи­мущественно с более легкими формами заболевания - гемии диплегией). Описанные в работе нежелательные явления (повышение температуры тела, тошнота, рвота, гемоглобинурия), по мнению авторов, связаны с токсичностью криопротектора (диметилсульфоксида) и/или лизисом эритроцитов в процессе размораживания клеточной суспензии.

В работе K. Min и соавт. [74] представлены результаты двойного слепого рандомизированного плацебо-контроли-руемого исследования эффективности применения клеток ПК и эритропоэтина у пациентов с ДЦП. Фактически в работе идет речь о трансплантации клеток ПК, поскольку они подби­рались с учетом результатов HLA-типирования (совпадение не менее 4 из 6 аллелей), вводились в достаточно высокой дозе (не менее 3х10⁷ клеток/кг) и после "кондиционирова­ния" пациента циклоспорином. С этим, возможно, и связан высокий уровень нежелательных реакций (преимущественно инфекционного генеза и/или со стороны желудочно-кишеч­ного тракта), приведший к экстренной госпитализации 9 и гибели 1 из 105 пациентов, участвовавших в исследовании. Тем не менее в группе пациентов, получавших клетки, через 6 мес было выявлено достоверное улучшение показателей неврологического статуса, когнитивных функций и физиче­ской активности по сравнению с контрольной группой.

Справедливости ради следует отметить, что определен­ные успехи были достигнуты в применении клеток ПК для лечения аутизма и некоторых других психических заболева­ний [25, 75-78].

Наиболее последовательную политику в отношении применения клеток ПК при заболеваниях ЦНС можно про­следить в работах команды исследователей под руковод­ством профессора J. Kurtzberg Дж. (Университет Дьюка, США). Начиная с 2010 г. коллективом была опубликована целая серия работ, целью которых стало изучение как био­логических особенностей самих клеток, так и безопасности и эффективности внутривенного введения клеток ауто­логичной ПК при ряде перинатальных поражений голов­ного мозга, включая врожденную гидроцефалию и ДЦП [75, 79-82].

Так, с марта 2004 г. по декабрь 2009 г. были проведены ограниченные клинические исследования безопасности и эффективности внутривенной инфузии аутологичных клеток ПК пациентам детского возраста с приобретенными неврологическими заболеваниями [83, 84]. Большин­ство единиц ПК были предоставлены частными банками крови. В общей сложности выполнено 198 трансфузий 184 пациентам, из которых 140 был поставлен диагноз ДЦП, 23 - "гидроцефалия". Доза вводимых клеток составляла не менее 10⁷ на 1 кг массы тела пациента; для снижения риска нежелательных реакций клетки предварительно отмывали от криопротектора, а само введение проводилось после премедикации метилпреднизолоном. Основное внимание в работе было уделено сравнительным характеристикам образцов, полученных из частных или публичных банков пуповинной крови и деталям их подготовки; данные по кли­нической эффективности в публикации отсутствуют. Тем не менее низкая частота серьезных нежелательных явлений (3 случая анафилактических реакций в первые минуты процедуры) и отсутствие аутоиммунных, инфекционных, онко­логических и иных осложнений на протяжении последующих 12 мес позволили авторам сделать заключение о безопасно­сти и перспективности предложенного подхода.

В последующем за этим исследовании (октябрь 2006 г. -август 2014 г.) 76 пациентов детского возраста (от 6 дней до 4,5 года) с врожденной гидроцефалией получили в общей сложности 143 введения клеток ПК при средней дозе 1,9х10⁷ клеток/кг [80]. Примечательно, что у большинства пациентов процедура проводилась повторно (у 45 - дважды, у 18 - трижды). И вновь основное внимание в работе уде­лено анализу особенностей использованных "доз" клеток и их подготовке к трансфузии; данные по эффективности отсутствуют, несмотря на достаточно длительный период наблюдения (до 7 лет). Тем не менее серьезных побочных реакций не выявлено ни у одного из пациентов-участников, что позволило авторам трактовать процедуру повторного введения как безопасную.

Анализу эффективности предлагаемого подхода (опять-таки аутологичных клеток ПК) посвящена более поздняя публи­кация результатов рандомизированного проспективного двой­ного слепого плацебо-контролируемого исследования [79]. Группе из 63 пациентов (1-6 лет) было выполнено одно­кратное внутривенное введение клеток в дозе 1-5х10⁷/кг. Из этических соображений группа плацебо также полу­чила введение клеток, но по прошествии 1 года наблюдения в качестве группы контроля. Полученные через год резуль­таты эффективности оказались не столь радужными, как, воз­можно, ожидалось: достоверных различий между основной и контрольной группами по шкалам PDMS-2 и GMFM-66 выяв­лено не было. Единственные достоверные различия были обнаружены между группами, получившими большее или меньшее относительно медианы 2х10⁷ клеток/кг число клеток: больше - лучше, из чего авторы заключают, что клинический эффект является дозозависимым, а для получения эффектив­ной дозы, зачастую недостижимой при использовании аутологичной крови, возможно, придется в дальнейшем подумать об использовании клеток донорского происхождения.

Именно этот путь и был выбран в последнем из опу­бликованных на сегодняшний день исследований [85], посвященном применению аллогенных (донорских) AB0-совместимых клеток ПК у пациентов взрослого возраста, перенесших ишемический инсульт. В ходе I фазы клиниче­ского исследования 10 пациентам (18-90 лет) с острым ишемическим инсультом в бассейне средней мозговой артерии однократно внутривенно вводили клетки ПК в промежутке 3-10 сут от момента события. Доза клеток варьиро­вала от 5х10⁶ до 5х10⁷ при медиане 1,54х10⁷ клеток/кг, что в абсолютных значениях составило 1,68 (0,84-2,92х10⁹) ядросодержащих клеток на введение. Через 3 мес улучшение в неврологическом, физическом и функциональном статусе (модифицированная шкала Рэнкина, шкала инсульта Наци­онального института здоровья США, индекс Бартела) было констатировано у всех пациентов. Несмотря на отсутствие контрольной группы и невозможность говорить о специ­фичности полученных эффектов, авторы работы настроены оптимистично и планируют проведение II фазы рандомизи­рованных плацебо-контролируемых исследований.

Практически в то же время (2007-2010 гг.) на базе ряда специализированных научно-исследовательских институтов Москвы и Санкт-Петербурга была проведена серия пилот­ных клинических исследований безопасности и эффектив­ности внутривенной инфузии "концентрата ядросодержащих клеток пуповинной/плацентарной крови" у пациентов с поражениями ЦНС различного генеза [77, 86-93]. В каче­стве терапевтического средства использовалась отмытая от криопротектора суспензия аллогенных ABO/Rh-идентичных ядросодержащих клеток ПК. В отличие от зарубежных иссле­дований, где доза клеток варьировала и вводилась преиму­щественно по принципу "все и сразу", в данном случае она была стандартизована и составляла около 250-300 млн кле­ток на введение.

Последующее наблюдение за пациентами на про­тяжении от 3-12 мес до 3-4 лет показало, что введение (в том числе повторное) клеток ПК хорошо переносится и не вызывает острых или отдаленных нежелательных реак­ций. Напротив, у большинства пациентов как взрослого, так и детского возраста наблюдалось значительное сни­жение степени неврологического дефицита и улучшение когнитивных функций. Так, у детей и взрослых пациентов с травматическими поражениями головного мозга (пост­травматической энцефалопатией) отмечалась стойкая тен­денция к снижению проявлений астенического синдрома; существенно повышался уровень инициативы, психиче­ской и физической активности [77, 90, 94]. У пациентов с болезнью Паркинсона статистически значимое улучшение было отмечено по многим показателям: ригидности, брадикинезии и функциональным возможностям [86]. Стойкое, до нескольких лет, улучшение показателей психической активности (объема повседневной активности, памяти, обу­чаемости, способности к концентрации внимания и т.д.), вплоть до достижения возрастной нормы, отмечено у больных шизофренией [77].

В исследование были включены 30 пациентов с ДЦП в возрасте от 1 года 3 мес до 10 лет (средний возраст 5±2,5 года). Основными клиническими проявлениями за­болевания были: спастический гемипарез (38,7%), тетрапарез (22,6%), эпилептический синдром (47,4%). После письменного информированного согласия паци­ентам были проведены 1 (8 пациентов) или 2 и более (22 пациента) внутривенных капельных инфузий кле­ток ПК (повторные введения проводились с интервалом в 2-4 нед). Дальнейшее наблюдение показало, что про­цедура хорошо переносится и не вызывает острых или отдаленных нежелательных реакций. Напротив, более чем у половины детей наблюдалась отчетливая положительная динамика: снижение патологически повышенного мышеч­ного тонуса на 1-2 балла, уменьшение степени парезов на 1-2 балла, снижение частоты (вплоть до полного пре­кращения) эпилептических приступов при сохранении дозы противосудорожных препаратов, снижение гиперкинезов, улучшение когнитивных функций (памяти, внимания, скорости реакций), мелкой моторики, зрительных функций и речи [77, 87, 88, 92, 93]. Лучшие результаты были достигнуты у пациентов, получивших 2 и более инфузий клеток ПК.

Исследования, проведенные в последующие годы на базе ФГБУ "Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова" Минздрава России (ныне -ФГБУ "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова" Минздрава России) и продолжающиеся в настоящее время, позволили систематизировать накоплен­ный материал и выявить ряд закономерностей [95].

Группу клеточной терапии составили 80 пациентов дет­ского возраста (1-12 лет) с клинически подтвержденным диагнозом ДЦП, включая 40 со спастической квадриплегией, 24 со спастической ди- или гемиплегией и 16 с другими фор­мами ДЦП. У большинства пациентов ДЦП ассоциировался с другими патологическими состояниями, такими как эпи­лепсия (n=20), врожденная гидроцефалия (n=7), частичная атрофия зрительных нервов (n=10) и другими поражениями (n=5). Большинство детей (n=55) имели задержку психиче­ского и речевого развития.

В соответствии с планами лечения и его стадией (началь­ное или продолжающееся) пациенты получили 1 (n=7), 2 (n=18), 3 (n=19), 4 (n=15) или 5 (n=14) введений клеток. 7 пациентов получили 6 введений клеток (2 начальных и 4 с промежутком в 4-6 мес). Время наблюдения соста­вило от 3 мес до 3 лет. За это время позитивная дина­мика была отмечена у 38 (69,1%) пациентов. Улучшение в неврологическом статусе характеризовалось снижением патологического мышечного тонуса в одной или более пораженных конечностей, возрастанием мышечной силы, снижением частоты эпилептических приступов. Улучше­ние в ментальной сфере (речь, память, внимание, интеллектуальное/эмоциональное развитие) было отмечено у 29 (52,7%) детей. 23 (41,8%) пациента продемонстри­ровали улучшение в обеих сферах. Негативной динамики не выявлено ни у одного пациента, получившего клеточную терапию.

Наилучшие результаты получены в ответ на 5 и более введений - 85,7 и 100% соответственно (r=0,48, p<0,0024). Сходная корреляция была выявлена при анализе измене­ний физического развития по шкале GMFCS - подавляющее большинство респондеров получили минимум 4 введения. В целом полученные результаты показали, что повторное внутривенное введение аллогенных HLA-несовместимых AB0/Rh-идентичных клеток ПК пациентам с ДЦП является безопасной и в большинстве случаев эффективной процеду­рой. По крайней мере, частичное улучшение в неврологиче­ском статусе, физической активности и/или интеллектуаль­ном развитии было достигнуто примерно в 70% случаев.

Заключение

Приведенные данные свидетельствуют о несомненных перспективах применения как клеток ПК, так и других отдель­ных ее компонентов в терапии достаточно широкого спек­тра патологических состояний организма. В особенности (за редким исключением) это касается использования кле­ток или их производных аллогенного происхождения - фак­тически "препарата с полки", способного сделать клеточ­ные интервенции и регенеративную медицину на основе клеток ПК доступными для всех пациентов, нуждающихся в этой терапии.

ЛИТЕРАТУРА

1. GLuckman E. UmbiLicaL cord bLood transfusions in Low-income countries // Lancet HaematoL. 2015. VoL. 2, N 3. P. e85-e86.

2. Theunissen K., VerfaiLLie C.M. A muLtifactoriaL anaLysis of umbiLicaL cord bLood, aduLt bone marrow and mobilized peripheraL bLood progenitors using the improved ML-IC assay // Exp. HematoL. 2005. VoL. 33, N 2. P. 165-172.

3. Ng Y.Y., van KesseL B., Lokhorst H.M., Baert M.R.M. et aL. Gene-expression profiLing of CD34+ ceLLs from various hematopoietic stem-ceLL sources reveaLs functionaL differences in stem-ceLL activity // J. Leukoc. BioL. 2004. VoL. 75, N 2. P. 314-323.

4. Hogan C.J., ShpaLL E.J., McNuLty O., McNiece I. et aL. Engraftment and deveLopment of human CD34(+)-enriched ceLLs from umbiLicaL cord bLood in NOD/LtSz-scid/scid mice // BLood. 1997. VoL. 90, N 1. P. 85-96.

5. Sakabe H., Yahata N., Kimura T., Zeng Z.Z. et aL. Human cord bLood-derived primitive progenitors are enriched in CD34+c-kit- ceLLs: correLation between Long-term cuLture-initiating ceLLs and teLomerase expression. Leukemia. 1998. VoL. 12, N 5. P. 728-734.

6. HiLdbrand P., CiruLLi V., Prinsen R.C., Smith K.A. et aL. The roLe of angiopoietins in the deveLopment of endotheLiaL ceLLs from cord bLood CD34+ progenitors // BLood. 2004. VoL. 104, N 7. P. 2010-2019.

7. SaLven P., Mustjoki S., ALitaLo R., ALitaLo K. et aL. VEGFR-3 and CD133 identify a popuLation of CD34+ Lymphatic/vascuLar endotheLiaL precursor ceLLs // BLood. 2003. VoL. 101, N 1. P. 168-172.

8. Cho S.-W., Gwak S.-J., Kang S.-W., Bhang S.H. et aL. Enhancement of angiogenic efficacy of human cord bLood ceLL transpLantation // Tissue Eng. 2006. VoL. 12, N 6. P. 1651-1661.

9. Botta R., Gao E., Stassi G., Bonci D. et aL. Heart infarct in NOD-SCID mice: therapeutic vascuLogenesis by transpLantation of human CD34+ ceLLs and Low dose CD34+KDR+ ceLLs // FASEB J. 2004. VoL. 18, N 12. P. 1392-1394.

10. Zhao Y., Wang H., Mazzone T. Identification of stem ceLLs from human umbiLicaL cord bLood with embryonic and hematopoietic characteristics // Exp. CeLL Res. 2006. VoL. 312, N 13. P. 2454-2464.

11. Kogler G., Sensken S., Airey J.A., Trapp T. et al. A new human somatic stem cell from placental cord blood with intrinsic pluripotent differentiation potential // J. Exp. Med. 2004. Vol. 200, N 2. P. 123-135.

12. McGuckin C.P., Forraz N., Allouard Q., Pettengell R. Umbilical cord blood stem cells can expand hematopoietic and neuroglial progenitors in vitro // Exp. Cell Res. 2004. Vol. 295, N 2. P. 350-359.

13. Gluckman E., Broxmeyer H.A., Auerbach A.D., Friedman H.S. et al. Hematopoietic reconstitution in a patient with Fanconi's anemia by means of umbilical-cord blood from an HLA-identical sibling // N. Engl. J. Med. 1989. Vol. 321, N 17. P. 1174-1178.

14. Ballen K.K., Gluckman E., Broxmeyer H.E. Umbilical cord blood transplantation: the first 25 years and beyond // Blood. 2013. Vol. 122, N 4. P. 491-498.

15. Ballen K. Update on umbilical cord blood transplantation // F1000Research. 2017. Vol. 6. P. 1556.

16. Christensen R.D., Carroll P.D., Josephson C.D. Evidence-based advances in transfusion practice in neonatal intensive care units // Neonatology. 2014. Vol. 106, N 3. P. 245-253.

17. Eichler H., Schaible T., Richter E., Zieger W. et al. Cord blood as a source of autologous RBCs for transfusion to preterm infants // Transfusion. 2000. Vol. 40, N 9. P. 1111-1117.

18. Khodabux C.M., Brand A. The use of cord blood for transfusion purposes: current status // Vox Sang. 2009. Vol. 97, N 4. P. 281-293.

19. Khodabux C.M., van Beckhoven J.M., Scharenberg J.G.M., El Barjiji F. et al. Processing cord blood from premature infants into autologous red-blood-cell products for transfusion // Vox Sang. 2011. Vol. 100, N 4. P. 367-373.

20. Strauss R.G., Widness J.A. Is there a role for autologous/placental red blood cell transfusions in the anemia of prematurity? // Transfus. Med. Rev. 2010. Vol. 24, N 2. P. 125-129.

21. Imura K., Kawahara H., Kitayama Y., Yoneda A. et al. Usefulness of cord-blood harvesting for autologous transfusion in surgical newborns with antenatal diagnosis of congenital anomalies // J. Pediatr. Surg. 2001. Vol. 36, N 6. P. 851-854.

22. Taguchi T., Suita S., Nakamura M., Yamanouchi T. et al. The efficacy of autologous cord-blood transfusions in neonatal surgical patients // J. Pediatr. Surg. 2003. Vol. 38, N 4. P. 604-607.

23. Jansen M., Brand A., von Lindern J.S., Scherjon S. et al. Potential use of autologous umbilical cord blood red blood cells for early transfusion needs of premature infants // Transfusion. 2006. Vol. 46, N 6. P. 1049-1056.

24. Романов Ю.А., Балашова Е.Е., Быстрых О.А., Титков К.В. и др. Пуповинная кровь для аутологичной трансфузии в раннем постнатальном периоде: анализ клеточного состава и жизнеспособности клеток при дли­тельном хранении // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2014. № 4. С. 206-214.

25. Kotowski M., Litwinska Z., Klos P., Pius-Sadowska E. et al. Autologous cord blood transfusion in preterm infants - could its humoral effect be the kez to control prematurity-related complications? A preliminary study // J. Physiol. Pharmacol. 2017. Vol. 68, N 6. P. 921-927.

26. Cotten C.M., Murtha A.P., Goldberg R.N., Grotegut C.A. et al. Feasibility of autologous cord blood cells for infants with hypoxic-ischemic encephalopathy // J. Pediatr. 2014. Vol. 164, N 5. P. 973-979.e1.

27. Astori G., Amati E., Bambi F., Bernardi M. et al. Platelet lysate as a substitute for animal serum for the ex-vivo expansion of mesenchymal stem/ stromal cells: present and future // Stem Cell Res. Ther. 2016. Vol. 7, N 1. P. 93.

28. Riordan N.H., Madrigal M., Reneau J., de Cupeiro K. et al. Scalable efficient expansion of mesenchymal stem cells in xeno free media using commercially available reagents // J. Transl. Med. 2015. Vol. 13. P. 232.

29. Suchankova Kleplova T., Soukup T., Rehacek V., Suchanek J. Human plasma and human platelet-rich plasma as a substitute for fetal calf serum during long-term cultivation of mesenchymal dental pulp stem cells // Acta Medica (Hradec Kralove). 2014. Vol. 57, N 3. P. 119-126.

30. Diez J.M., Bauman E., Gajardo R., Jorquera J.I. Culture of human mesenchymal stem cells using a candidate pharmaceutical grade xeno-free cell culture supplement derived from industrial human plasma pools // Stem Cell Res. Ther. 2015. Vol. 6. P. 28.

31. Romanov Y.A., Balashova E.E., Volgina N.E., Kabaeva N.V. et al. Human umbilical cord blood serum: effective substitute of fetal bovine serum for culturing of human multipotent mesenchymal stromal cells // Bull. Exp. Biol. Med. 2017. Vol. 162, N 4. P. 528-533.

32. Castellano J.M., Mosher K.I., Abbey R.J., McBride A.A. et al. Human umbilical cord plasma proteins revitalize hippocampal function in aged mice // Nature. 2017. Vol. 544, N 7651. P. 488-492.

33. Pereira T., Ivanova G., Caseiro A.R., Barbosa P. et al. MSCs conditioned media and umbilical cord blood plasma metabolomics and composition // PLoS One. 2014. Vol. 9, N 11. Article ID e113769.

34. Hu Y., Rao S.-S., Wang Z.-X., Cao J. et al. Exosomes from human umbilical cord blood accelerate cutaneous wound healing through miR-21-3p-mediated promotion of angiogenesis and fibroblast function // Theranostics. 2018. Vol. 8, N 1. P. 169-184.

35. Popkov V.A., Silachev D.N., Jankauskas S.S., Zorova L.D. et al. Molecular and cellular interactions between mother and fetus. Pregnancy as a rejuvenating factor // Biochemistry (Mosc.). 2016. Vol. 81, N 12. P. 1480-1487.

36. Galieva L.R., Mukhamedshina Y.O., Arkhipova S.S., Rizvanov A.A. Human umbilical cord blood cell transplantation in neuroregenerative strategies // Front. Pharmacol. 2017. Vol. 8. P. 628.

37. Horowitz A.M., Villeda S.A. Therapeutic potential of systemic brain rejuvenation strategies for neurodegenerative disease // F1000Research. 2017. Vol. 6. P. 1291.

38. Lo Y.M., Lo E.S., Watson N., Noakes L. et al. Two-way cell traffic between mother and fetus: biologic and clinical implications // Blood. 1996. Vol. 88, N 11. P. 4390-4395.

39. Bianchi D.W., Zickwolf G.K., Weil G.J., Sylvester S. et al. Male fetal progenitor cells persist in maternal blood for as long as 27 years postpartum // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1996. Vol. 93, N 2. P. 705-708.

40. O'Donoghue K., Chan J., de la Fuente J., Kennea N. et al. Microchimerism in female bone marrow and bone decades after fetal mesenchymal stem-cell trafficking in pregnancy // Lancet (London, England). 2004. Vol. 364, N 9429. P. 179-182.

41. Yoon K.C. Use of umbilical cord serum in ophthalmology // Chonnam Med. J. 2014. Vol. 50, N 3. P. 82-85.

42. Vajpayee R.B., Mukerji N., Tandon R., Sharma N. et al. Evaluation of umbilical cord serum therapy for persistent corneal epithelial defects // Br. J. Ophthalmol. 2003. Vol. 87, N 11. P. 1312-1316.

43. Yoon K.-C., Heo H., Jeong I.-Y., Park Y.-G. Therapeutic effect of umbilical cord serum eyedrops for persistent corneal epithelial defect // Korean J. Ophthalmol. 2005. Vol. 19, N 3. P. 174-178.

44. Hassall O., Bedu-Addo G., Adarkwa M., Danso K. et al. Umbilical-cord blood for transfusion in children with severe anaemia in under-resourced countries // Lancet (London, England). 2003. Vol. 361, N 9358. P. 678-679.

45. Bhattacharya N. Placental umbilical cord whole blood transfusion: a safe and genuine blood substitute for patients of the under-resourced world at emergency // J. Am. Coll. Surg. 2005. Vol. 200, N 4. P. 557-563.

46. Bhattacharya N. Placental umbilical cord blood transfusion: a novel method of treatment of patients with malaria in the background of anemia // Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2006. Vol. 33, N 1. P. 39-43.

47. Bhattacharya N. Placental umbilical cord whole blood transfusion to combat anemia in the background of tuberculosis and emaciation and its potential role as an immuno-adjuvant therapy for the under-resourced people of the world // Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2006. Vol. 33, N 2. P. 99-104.

48. Bhattacharya N. A preliminary report of 123 units of placental umbilical cord whole blood transfusion in HIV-positive patients with anemia and emaciation // Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2006. Vol. 33, N 2. P. 117-121.

49. Riordan N.H., Chan K., Marleau A.M., Ichim T.E. Cord blood in regenerative medicine: do we need immune suppression? // J. Transl. Med. 2007. Vol. 5. P. 8.

50. Chen J., Sanberg P.R., Li Y., Wang L. et al. Intravenous administration of human umbilical cord blood reduces behavioral deficits after stroke in rats // Stroke. 2001. Vol. 32, N 11. P. 2682-2688.

51. Borlongan C.V., Hadman M., Sanberg C.D., Sanberg P.R. Central nervous system entry of peripherally injected umbilical cord blood cells is not required for neuroprotection in stroke // Stroke. 2004. Vol. 35, N 10. P. 2385-2389.

52. Newman M.B., Willing A.E., Manresa J.J., Sanberg C.D. et al. Cytokines produced by cultured human umbilical cord blood (HUCB) cells: implications for brain repair // Exp. Neurol. 2006. Vol. 199, N 1. P. 201-208.

53. Vendrame M., Cassady J., Newcomb J., Butler T. et al. Infusion of human umbilical cord blood cells in a rat model of stroke dose-dependently rescues behavioraL deficits and reducesinfarct voLume // Stroke. 2004. VoL. 35, N 10. P. 2390-2395.

54. PimenteL-CoeLho P.M., Mendez-Otero R. CeLL therapy for neonataL hypoxic-ischemic encephaLopathy // Stem CeLLs Dev. 2010. VoL. 19, N 3. P. 299-310.

55. Meier C., MiddeLanis J., WasieLewski B., Neuhoff S., Roth-Haerer A. et aL. Spastic paresis after perinataL brain damage in rats is reduced by human cord bLood mononucLear ceLLs // Pediatr. Res. 2006. VoL. 59, N 2. P. 244-249.

56. Rosenkranz K., Kumbruch S., Tenbusch M., Marcus K. et aL. TranspLantation of human umbiLicaL cord bLood ceLLs mediated beneficiaL effects on apoptosis, angiogenesis and neuronaL survivaL after hypoxic-ischemic brain injury in rats // CeLL Tissue Res. 2012. VoL. 348, N 3. P. 429-438.

57. de PauLa S., Greggio S., Marinowic D.R., Machado D.C. et aL. The dose-response effect of acute intravenous transpLantation of human umbiLicaL cord bLood ceLLs on brain damage and spatiaL memory deficits in neonataL hypoxiaischemia // Neuroscience. 2012. VoL. 210. P. 431-441.

58. DaLous J., Larghero J., Baud O. TranspLantation of umbiLicaL cord-derived mesenchymaL stem ceLLs as a noveL strategy to protect the centraL nervous system: technicaL aspects, precLinicaL studies, and cLinicaL perspectives // Pediatr. Res. 2012. VoL. 71, N 4. Pt 2. P. 482-490.

59. DaLous J., Pansiot J., Pham H., ChateL P. et aL. Use of human umbiLicaL cord bLood mononucLear ceLLs to prevent perinataL brain injury: a precLinicaL study // Stem CeLLs Dev. 2013. VoL. 22, N 1. P. 169-179.

60. CarroLL J. Human cord bLood for the hypoxic-ischemic neonate // Pediatr. Res. 2012. VoL. 71, N 4. Pt 2. P. 459-463.

61. Bae S.-H., Kong T.-H., Lee H.-S., Kim K.-S. et aL. Long-Lasting paracrine effects of human cord bLood ceLLs on damaged neocortex in an animaL modeL of cerebraL paLsy // CeLL TranspLant. 2012. VoL. 21, N 11. P. 2497-2515.

62. Lu D., Sanberg P.R., Mahmood A., Li Y. et aL. Intravenous administration of human umbiLicaL cord bLood reduces neuroLogicaL deficit in the rat after traumatic brain injury // CeLL TranspLant. 2002. VoL. 11, N 3. P. 275-281.

63. Ryabov S.I., Zvyagintseva M.A., PavLovich E.R., Smirnov V.A. et aL. Efficiency of transpLantation of human pLacentaL/umbiLicaL bLood ceLLs to rats with severe spinaL cord injury // BuLL. Exp. BioL. Med. 2014. VoL. 157, N 1. P. 85-88.

64. Ende N., Weinstein F., Chen R., Ende M. Human umbiLicaL cord bLood effect on sod mice (amyotrophic LateraL scLerosis) // Life Sci. 2000. VoL. 67, N 1. P. 53-59.

65. Garbuzova-Davis S., WiLLing A.E., Zigova T., Saporta S. et aL. Intravenous administration of human umbiLicaL cord bLood ceLLs in a mouse modeL of amyotrophic LateraL scLerosis: distribution, migration, and differentiation // J. Hematother. Stem CeLL Res. 2003. VoL. 12, N 3. P. 255-270.

66. Chen S.H., Chang F.M., Tsai Y.C., Huang K.F. et aL. Infusion of human umbiLicaL cord bLood ceLLs protect against cerebraL ischemia and damage during heatstroke in the rat // Exp. NeuroL. 2006. VoL. 199, N 1. P. 67-76.

67. Domanska-Janik K., Buzanska L., Lukomska B. A novel, neuraL potentiaL of non-hematopoietic human umbiLicaL cord bLood stem ceLLs // Int. J. Dev. BioL. 2008. VoL. 52, N 2-3. P. 237-248.

68. Arien-Zakay H., Lecht S., NagLer A., Lazarovici P. Human umbiLicaL cord bLood stem ceLLs: rationaL for use as a neuroprotectant in ischemic brain disease // Int. J. MoL. Sci. 2010. VoL. 11, N 9. P. 3513-3528.

69. Fan C.-G., Zhang Q.-J., Tang F.-W., Han Z.-B. et aL. Human umbiLicaL cord bLood ceLLs express neurotrophic factors // Neurosci. Lett. 2005. VoL. 380, N 3. P. 322-325.

70. Xiao J., Nan Z., Motooka Y., Low W.C. TranspLantation of a noveL ceLL Line popuLation of umbiLicaL cord bLood stem ceLLs ameLiorates neuroLogicaL deficits associated with ischemic brain injury // Stem CeLLs Dev. 2005. VoL. 14, N 6. P. 722-733.

71. Yang W.-Z., Zhang Y., Wu F., Min W.-P. et aL. Safety evaLuation of aLLogeneic umbiLicaL cord bLood mononucLear ceLL therapy for degenerative conditions // J. TransL. Med. 2010. VoL. 8. P. 75.

72. Yang W.-Z., Zhang Y., Wu F., Zhang M. et aL. Human umbiLicaL cord bLood-derived mononucLear ceLL transpLantation: case series of 30 subjects with hereditary ataxia // J. TransL. Med. 2011. VoL. 9. P. 65.

73. Lee Y.-H., Choi K.V., Moon J.H., Jun H.-J. et aL. Safety and feasibiLity of countering neuroLogicaL impairment by intravenous administration of autoLogous cord bLood in cerebraL paLsy // J. TransL. Med. 2012. VoL. 10. P. 58.

74. Min K., Song J., Kang J.Y., Ko J. et aL. UmbiLicaL cord bLood therapy potentiated with erythropoietin for chiLdren with cerebraL paLsy: a doubLe-bLind, randomized, pLacebo-controLLed triaL // Stem CeLLs. 2013. VoL. 31, N 3. P. 581-591.

75. Sun J.M., Kurtzberg J. CeLL therapy for diverse centraL nervous system disorders: inherited metaboLic diseases and autism // Pediatr. Res. 2018. VoL. 83, N 1-2. P. 364-371.

76. Lv Y.-T., Zhang Y., Liu M., Qiuwaxi J. et aL. TranspLantation of human cord bLood mononucLear ceLLs and umbiLicaL cord-derived mesenchymaL stem ceLLs in autism // J. TransL. Med. 2013. VoL. 11. P. 196.

77. Смирнов В.Н., Романов Ю.А., Пальцев М.А., Поляков Ю.И. и др. Те­рапевтический потенциал клеток пуповинной крови при неврологических и психических заболеваниях // Клеточная трансплантология и тканевая ин­женерия. 2011. Т. 6, № 1. С. 25-26.

78. Смулевич А.Б., Дубницкая Э.Б., Воронова Е.И., Морозова Я.В. и др. Эффективность клеток пуповинной крови у пациентов с терапевтически ре­зистентными депрессиями // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2015. № 4. С. 279-285.

79. Sun J.M., Song A.W., Case L.E., Mikati M.A. et aL. Effect of autoLogous cord bLood infusion on motor function and brain connectivity in young chiLdren with cerebraL paLsy: a randomized, pLacebo-controLLed triaL // Stem CeLLs TransL. Med. 2017. VoL. 6, N 12. P. 2071-2078.

80. Sun J.M., Grant G.A., McLaughLin C., ALLison J. et aL. Repeated autoLogous umbiLicaL cord bLood infusions are feasibLe and had no acute safety issues in young babies with congenitaL hydrocephaLus // Pediatr. Res. 2015. VoL. 78, N 6. P. 712-716.

81. Dawson G., Sun J.M., DavLantis K.S., Murias M. et aL. AutoLogous cord bLood infusions are safe and feasibLe in young chiLdren with autism spectrum disorder: resuLts of a singLe-center phase I open-LabeL triaL // Stem CeLLs TransL. Med. 2017. VoL. 6, N 5. P. 1332-1339.

82. Sun J.M., Kurtzberg J. Cord bLood for brain injury // Cytotherapy. 2015. VoL. 17, N 6. P. 775-785.

83. Sun J., ALLison J., McLaughLin C., SLedge L. et aL. Differences in quaLity between privateLy and pubLicLy banked umbiLicaL cord bLood units: a piLot study of autoLogous cord bLood infusion in chiLdren with acquired neuroLogic disorders // Transfusion. 2010. VoL. 50, N 9. P. 1980-1987.

84. Liao Y., Cotten M., Tan S., Kurtzberg J. et aL. Rescuing the neonataL brain from hypoxic injury with autoLogous cord bLood // Bone Marrow TranspLant. 2013. VoL. 48, N 7. P. 890-900.

85. Laskowitz D., Bennett E., Durham R., VoLpi J. et aL. ALLogeneic umbiLicaL cord bLood infusion for aduLts with ischemic stroke (CoBIS): cLinicaL outcomes from a phase 1 safety study // Stem CeLLs TransL Med. 2018 May 12. ArticLe ID 29752869. doi: 10.1002/sctm.18-0008.

86. KLimov I.A., Chachatrian W.A., Lebedev K.E., Romanov Y. et aL. Intravenous infusion of cord bLood ceLLs (CBC) in patients with Parkinson disease. 3rd Int. Conf. Drug. Discov. Ther. Feb 7-10, 2011, Dubai, UAE // Curr. Med. Chem. 2011. Sp. Issue. Abstr. 212.

87. Chachatrian W.A., Lebedev K.E., Romanov Y., Smirnov V.N. Cord bLood ceLLs (CBC) in the treatment of cerebraL paLsy. 3rd Int. Conf. Drug Discov. Ther. Feb 7-10, 2011, Dubai, UAE // Curr. Med. Chem. 2011. Sp. Issue. Abstr. 105.

88. Smirnov V.N., Romanov Y.A., PaLtsev M.A., Smirnov V.A. et aL. Therapeutic potentiaL of human cord bLood ceLLs in patients with neuroLogicaL and psychiatric disorders. "MSC2009" - Regen Med. AduLt Stem CeLL Ther., August 17-19, 2009. CLeveLand, OH, 2009. P. 112.

89. Smirnov V.N., Romanov Y.A., Radaev S.M., Dugina T.N. et aL. Human umbiLicaL cord bLood ceLLs in the treatment of patients with cerebraL paLsy: a three-year experience. 8th Ann. WorLd Congr. Regen. Med. Stem CeLLs, March 19-21, 2015. Korea, 2015. P. 95.

90. Semenova J.B., Ahadov T.A., Karaseva O.V., Semenova N.A. et aL. Cord bLood ceLLs (CBC) in the treatment of chiLdreb brain trauma. 3rd Int. Conf. Drug Discov. Ther. Feb 7-10, 2011, Dubai, UAE // Curr. Med. Chem. 2011. Sp Issue. Abstr. 206.

91. Романов Ю.А., Хачатрян В.А., Лебедев К.Э., Радаев С.М. и др. Тера­певтический потенциал клеток пуповинной крови при перинатальных пора­жениях головного мозга // Материалы конференции "Детский церебральный паралич и другие расстройства движения у детей". М., 17-18 нояб. 2011. С. 152-153.

92. Романов Ю.А., Тараканов О.П., Радаев С.М., Дугина Т.Н. и др. Терапев­тический потенциал клеток пуповинной крови в лечении спастических форм детского церебрального паралича Материалы 2-й конференции "Детский церебральный паралич и другие нарушения движения у детей". М., 5-6 окт. 2012. С. 122.

93. Романов Ю.А., Тараканов О.П., Радаев С.М., Дугина Т.Н. др. Ис­пользование концентрата ядросодержащих клеток пуповинной крови в лечении спастических форм ДЦП // Материалы III ежегодной научно-прак­тической конференции с международным участием "Детский церебральный паралич и другие нарушения движения у детей". М., 30 окт. - 1 нояб. 2013. С. 78-79.

94. Семенова Ж.Б., Сушкевич Г.Н., Карасева О.В., Ахадов Т.А. и др. Ис­пользование концентрата стволовых клеток пуповинной, плацентарной крови в лечении последствий тяжелой черепно-мозговой травмы у детей // Нейрохирургия и неврология детского возраста. 2011. № 1. С. 70-82.

95. Romanov Y.A., Tarakanov O.P., Radaev S.M., Dugina T.N. et al. Human allogeneic AB0/Rh-identical umbilical cord blood cells in the treatment ofjuvenile patients with cerebral palsy // Cytotherapy. 2015. Vol. 17, N 7. P. 969-978.

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)